瞬時(shí)轉(zhuǎn)染的表達(dá),外源基因?qū)胝匣蚪M的幾率非常低,絕大部分以游離形式存在,且隨著細(xì)胞傳代質(zhì)粒會(huì)不斷發(fā)生丟失,導(dǎo)致最后拷貝數(shù)被稀釋,無法達(dá)到持續(xù)表達(dá)外源基因的目的。一般用轉(zhuǎn)染試劑進(jìn)行質(zhì)粒轉(zhuǎn)染,多為瞬時(shí)轉(zhuǎn)染。
將外源DNA克隆到帶有某種抗性的慢病毒載體上并進(jìn)行病毒包裝,在慢病毒成功感染細(xì)胞后,慢病毒基因組會(huì)整合到宿主細(xì)胞的染色體中,用載體中所含的抗性標(biāo)志進(jìn)行篩選,成功感染的細(xì)胞可以在培養(yǎng)基中存活,而未感染上慢病毒的細(xì)胞則無法存活。因此在抗性篩選壓力下,可成功篩選來得到可穩(wěn)定表達(dá)目的蛋白,或者穩(wěn)定表達(dá)沉默特定基因的細(xì)胞株。
吉滿生物憑借多年的細(xì)胞培養(yǎng)及病毒包裝經(jīng)驗(yàn),推出細(xì)胞系構(gòu)建服務(wù),將攜帶外源基因的慢病毒感染到目的細(xì)胞中,通過篩選可獲得穩(wěn)定表達(dá)目的基因的細(xì)胞系,可用于基因功能研究。

吉滿生物細(xì)胞系構(gòu)建平臺(tái)